A.要避免細(xì)胞外RNase的污染抑制其活性
B.操作時(shí)必須戴手套和口罩
C.所有的玻璃器皿與溶液均應(yīng)以RNase的抑制劑DEPC進(jìn)行處理
D.對(duì)各種材料和試劑均要進(jìn)行嚴(yán)格的洗滌、純化和高壓消毒處理
E.在冰浴的條件下進(jìn)行操作,也是減低RNase活性的有效措施
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A.蛋白質(zhì)亞基的聚合
B.交叉聚合
C.分子識(shí)別
D.分子的自我裝配
E.多酶復(fù)合體
A.是一種可以水解核酸的酶,能識(shí)別和切割DNA分子中的特定核苷酸序列
B.Ⅱ型限制性內(nèi)切酶是基因重組中最常使用的工具酶
C.Ⅰ型和Ⅲ型限制性內(nèi)切酶具有修飾和依賴ATP活性的作用
D.通常識(shí)別的是4~8個(gè)特異性核苷酸順序
E.水解核酸后可以形成粘末端或平末端
A.SDS為生物陰離子去污劑,主要引起細(xì)胞膜的降解并能乳化脂質(zhì)和蛋白質(zhì)
B.EDTA為二價(jià)金屬離子螯合劑,可抑制DNase的活性,同時(shí)降低細(xì)胞膜的穩(wěn)定性
C.蛋白酶K有水解蛋白的作用,可消化DNase和細(xì)胞中的蛋白質(zhì)并裂解細(xì)胞
D.酚可使蛋白質(zhì)變性沉淀,也可抑制DNase的活性
E.pH8.0的Tris溶液能保證抽提后DNA進(jìn)入水相,避免滯留在蛋白質(zhì)層
A.該法是一種條件比較劇烈的方法
B.煮沸不能完全滅活核酸內(nèi)酶A
C.適用于大多數(shù)E.coli菌株
D.不適用于表達(dá)endA的菌株
E.只能用于小質(zhì)粒DNA(<15kb)的小量制備
A.陰離子交換層析
B.凝膠過(guò)濾
C.陽(yáng)離子交換層析
D.低層析
E.電泳
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