下面是將乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過程及有關(guān)資料，請分析回答下列問題。
【資料1】巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營養(yǎng)型酵母菌，能將甲醇作為其唯一碳源，此時AOX1基因受到誘導(dǎo)而表達(dá)【5’AOX1和3’AOX1（TT）分別是基因AOX1的啟動子和終止子】。
【資料2】巴斯德畢赤酵母菌體內(nèi)無天然質(zhì)粒，所以科學(xué)家改造出了圖1所示的pPIC9K質(zhì)粒用作載體，其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組，將目的基因整合于染色體中以實(shí)現(xiàn)表達(dá)。
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仔鼠出生后可用其尾巴進(jìn)行DNA檢測，通過（）方法，檢測出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應(yīng)的抗體進(jìn)行（）雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因（）。
被①處理后的分散細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的（），此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌無毒的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。
圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有（）（至少寫三種）。
圖中①一般經(jīng)（）處理可以得到③，從③到④的過程中涉及到的生物技術(shù)有（）和（）。
④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基？理由是什么？
若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割？說明理由。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？
述抗蟲棉植株的后代種子種植下去后，往往有很多植株不再具有抗蟲性，原因是（），要想獲得純合體，常采用的方法是（）。
若研究發(fā)現(xiàn)羊N細(xì)胞中線粒體發(fā)達(dá)，故而它的產(chǎn)奶率高，則小羊a會有這一優(yōu)良性狀嗎？你的依據(jù)是什么？
“分子運(yùn)輸車”是（）。
導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么？