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問答題細菌的限制—修飾系統(tǒng)有什么意義？

1.問答題什么是細菌的限制—修飾系統(tǒng)？（restriction-modificationsystem，R-Msystem）

2.問答題用 Klenow 酶填補的辦法可使 5’黏性末端轉變成平末端。這種方法常使 DNA 上的某些限制酶的識別位點消失。請問，對于下列限制酶，用這種方法處理會不會使它們的識別序列都消失？BamH I（G↓GATCC）； Taq I（T↓CGA），BssHⅡ（G↓CGCGC）。

3.問答題用連接酶將 Sau 3AI（，bGATC）切割的 DNA與經 BamHI（G↓’GATCC）切割的 DNA連接起來后，能夠被 BamHI 切割的機率有多大（用百分比表示）？

4.問答題下面幾種序列中你認為哪一個（哪些）最有可能是Ⅱ類酶的識別序列：GAATCG，AAATTT， GATATC，ACGGCA？為什么？

（1） GATATC；AAATUF；
（2）因為它們是回文序列。

5.問答題在序列 5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一個 6bp 的Ⅱ類限制性內切核酸酶的識別序列，該位點的序列可能是什么？

6.問答題某學生在用 EcoRI切割外源 DNA片段時，出現(xiàn)了星號活性，請分析可能的原因？

7.問答題有些噬菌體和質粒常常編碼一些抗限制性酶的蛋白以中和宿主的限制系統(tǒng)。你認為噬菌體和質粒還有哪些可能的方式避免宿主的限制作用？

8.問答題Fredrick 和 McClarin等用一個由 13 個堿基對的 DNA片段與 EcoRI、反應，然后分離到酶和 DNA 共結晶的復合物，通過 X射線分析發(fā)現(xiàn)了什么？

9.問答題在酶切反應緩沖液中加入 BSA的目的是什么？機理是什么？

目的是保護酶活性，機理是通過提高溶液中蛋白質的濃度，防止酶失活。

10.問答題說明 SangerDNA 測序法的原理。