S1核酸酶（S1 nuclease）是從米曲霉（Aspergillus  oryzae）中分離純化的一種含（）金屬蛋白，分子量為32kDa，是一種耐熱的酶（37—65％）。

從小牛胸腺中分離純化的末端轉(zhuǎn)移酶催化的基本反應(yīng)是將（），同時(shí)釋放出離的無(wú)機(jī)磷。催化反應(yīng)時(shí)不需（），但需要引物，單鏈 DNA是最好的引物單鏈 DNA 受體的長(zhǎng)度最短需有（）個(gè) dNTP。具有 3，突出末端的雙鏈 DNA是較好的反應(yīng)底物。二價(jià)離子和DNA末端狀態(tài)對(duì)催化反應(yīng)影響較大，但是用（）為輔助離子，可以催化任何形式的末端（突出的、隱含的、平齊的）加接單核苷酸，但突出的 3’端效率較高。以Mn²⁺ ／Mg²⁺作為輔助因子，只能在單鏈DNA或雙鏈 DNA3’突出端加尾。

反向轉(zhuǎn)錄酶（reverse transcriptase）是由（）kDa 和（）kDa 兩個(gè)單位組成的二聚體，作用時(shí)以 RNA為模板合成 DNA。

為了繪制長(zhǎng)為 3．0kb BamHⅠ限制性片段的限制性圖譜，分別用 EcoRI、HpaⅡ、EcoRI+HpaⅡ消化這一片段的三個(gè)樣品，然后通過(guò)凝膠電泳分離 DNA 片段，溴化乙錠染色后觀察 DNA帶型（圖 15．2）。請(qǐng)根據(jù)這些結(jié)果，繪制一個(gè)限制性圖譜，要標(biāo)明 EcoRI和 HpaⅡ識(shí)別位點(diǎn)間的相對(duì)位置，以及它們之間的距離（kb）。

在細(xì)菌質(zhì)粒 pBPI的四環(huán)素抗性基因 tet^R的中間有一個(gè) HindⅡ的切點(diǎn)。用 Hind  Ⅲ切割果蠅基因組 DNA，以 pBPl 為載體構(gòu)建基因組文庫(kù)。分子雜交證明克隆 15 帶有果蠅的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV對(duì)克隆 15 進(jìn)行了酶切分析，電泳結(jié)果如圖 15．1（用酶切的 pBPl質(zhì)粒 DNA作對(duì)照），旁邊標(biāo)出了片段的大小。