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問答題用加有注釋的圖表說明 F質(zhì)粒是怎樣從一個F⁺細(xì)胞轉(zhuǎn)移到F^—細(xì)胞。并簡要說明轉(zhuǎn)移復(fù)制如何不同于營養(yǎng)體的復(fù)制。

1.問答題 你能用哪一種基因轉(zhuǎn)移的方法確定下列位置。
（1）E．coli 染色體上一個新發(fā)現(xiàn)的基因座在其染色體上的位置；
（2）一個新分離的突變在基因內(nèi)的位置。

（1）Hfr轉(zhuǎn)化和中斷接合；
（2）轉(zhuǎn)導(dǎo)。

2.問答題你已經(jīng)分離了一個新的 F’因子，怎樣用最簡便的方法知道最初的 F因子的部分 DNA已經(jīng)被切除，并被一個外源DNA（也就是細(xì)菌DNA）所替代？

3.問答題怎樣從一個 E．coli的 Hfr 菌株中分離到一個 F ’^gal＋的菌株？

4.問答題解釋為什么不同的 Hfr 菌株具有不同的轉(zhuǎn)移起點和方向？

5.問答題為什么來自 Hfr×F^－的重組體幾乎總是F^－？

6.問答題雖然質(zhì)粒的帶動轉(zhuǎn)移給質(zhì)粒載體的安全性帶來一定的困難，但是通過帶動轉(zhuǎn)移將質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到特定的受體菌中也是基因工程中常用的實驗技術(shù)。請舉一例說明之。

7.問答題說明減少質(zhì)粒和噬菌體載體上某種酶的識別位點的方法和原理。

質(zhì)粒：體外誘變或體內(nèi)誘變（通過具有限制性作用的宿主）。
噬菌體：體外誘變。

8.問答題什么叫穿梭載體？

9.問答題列舉質(zhì)粒載體必須具備的 4 個基本特性。

（1）獨立復(fù)制；
（2）有選擇標(biāo)記；
（3）有獨特的酶切位點；
（4）能轉(zhuǎn)化但不擴(kuò)散。

10.問答題YAC 載體具有什么樣的功能性 DNA’序列？為什么在克隆大片段時，YAC 具有優(yōu)性？