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問答題如果知道某一基因的功能及其相應的蛋白質的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因？

1.問答題假定你分離到一個E．coli 的 Thy-突變體，并推測有可能是ThyA 基因突變。請設計一個方案用PCR從染色體DNA擴增突變的ThyA 基因，測定突變的序列。（注：E．coli 野生型的 ThyA 基因的序列是已知的）

2.問答題欲將一真核生物的結構基因克隆后轉移到原核生物（如 E．coli）中進行表達，克隆時應注意哪些問題？

3.問答題欲將一真核生物的結構基因克隆后轉移到原核生物（如 E．coli）中進行表達，克隆時應注意哪些問題？

4.問答題用限制性內切核酸酶切割 DNA 后，經電泳檢查，發(fā)現(xiàn)有拖尾現(xiàn)象，其可能的原因是什么？

5.問答題在構建cDNA文庫時，為什么常用GC接尾而不用AT接尾法連接？

6.問答題Muller的PCR 反應同大腸桿菌體內的 DNA復制有哪些不同？你認為根本的差別在哪里？

7.問答題何謂 YAC？主要特性是什么？

（1）含有來自其他生物 DNA的酵母人工染色體，叫 YAC；
（2）主要特性是可以克隆較大的外源片段。

8.問答題酵母人工染色體要在酵母細胞中穩(wěn)定存在，必須有哪些基本的結構？

（1）著絲粒；
（2）端粒；
（3）ARS序列。

9.問答題一個雙鏈DNA分子（為5，突出端）可采用哪些方法使之加上dAl00—120 的尾巴？

10.問答題一個雙鏈DNA分子（為5，突出端）可采用哪些方法使之加上dAl00—120 的尾巴？