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問答題在染色體步移中，用哪些方法獲得克隆的末端？

1.問答題何謂染色體步移（chromosome walking）？

2.問答題何謂定位克?。╬ositional cloning）？

3.問答題如果知道某一基因的功能及其相應的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因？

4.問答題假定你分離到一個E．coli 的 Thy-突變體，并推測有可能是ThyA 基因突變。請設計一個方案用PCR從染色體DNA擴增突變的ThyA 基因，測定突變的序列。（注：E．coli 野生型的 ThyA 基因的序列是已知的）

5.問答題欲將一真核生物的結構基因克隆后轉移到原核生物（如 E．coli）中進行表達，克隆時應注意哪些問題？

6.問答題欲將一真核生物的結構基因克隆后轉移到原核生物（如 E．coli）中進行表達，克隆時應注意哪些問題？

7.問答題用限制性內(nèi)切核酸酶切割 DNA 后，經(jīng)電泳檢查，發(fā)現(xiàn)有拖尾現(xiàn)象，其可能的原因是什么？

8.問答題在構建cDNA文庫時，為什么常用GC接尾而不用AT接尾法連接？

9.問答題Muller的PCR 反應同大腸桿菌體內(nèi)的 DNA復制有哪些不同？你認為根本的差別在哪里？

10.問答題何謂 YAC？主要特性是什么？

（1）含有來自其他生物 DNA的酵母人工染色體，叫 YAC；
（2）主要特性是可以克隆較大的外源片段。