以鄰硝基苯酚-β-吡喃半乳糖苷（ONPG）作為反應系統(tǒng)的底物，經過β-半乳糖苷酶作用后，釋放出硝基酚（ONP），后者呈（）色。在（）處有吸收峰，也可進行比色測定。酶活力（），釋放出的硝基酚越多，黃色越深。