A.巢式PCR多用于比較難于擴增或含量比較低的模板
B.進行兩輪擴增,第1次擴增的片段較第2次小
C.兩次擴增的引物相同
D.巢式PCR比常規(guī)PCR更不容易出現(xiàn)污染
E.第1次擴增的產(chǎn)物作為第2次擴增的引物
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A.引物濃度
B.初始模板量
C.TaqDNA聚合酶濃度
D.Mg濃度
E.反應變性的時間
A.是擴增曲線與熒光本底基線的交叉點處相應的反應循環(huán)數(shù)
B.可以根據(jù)Ct值的大小估計模板的初始量
C.Ct值大小與模板量呈正比,Ct值越大,模板量越多
D.是定量PCR外參照系統(tǒng)中重要的參數(shù)
E.Ct值大小與模板量呈反比,Ct值越小,模板量越多
A.可以定量或半定量檢測PCR產(chǎn)物的方法
B.定量PCR主要進行基因表達的分析和病原體的核酸檢測
C.水解探針技術中TaqMan探針的位置位于兩條引物之間
D.分子信標在自由狀態(tài)下為發(fā)夾結構,熒光信號極低
E.定量PCR在封閉狀態(tài)下進行,有效避免了產(chǎn)物的實驗室污染
A.首先應將RNA轉化為cDNA才能進行PCR
B.除了使用DNA聚合酶外,還應使用反轉錄酶
C.常用的反轉錄酶有AMV、MMLV,它們作用的最適溫度不同
D.Oligo(dT)引發(fā)的反轉錄反應理論上是細胞內(nèi)所有mRNA的反轉錄反應
E.反轉錄酶不需要引物即可進行反轉錄反應
A.引物的長度為18~25bp
B.引物內(nèi)部不能存在連續(xù)的互補序列,防止產(chǎn)生二聚體和發(fā)夾結構
C.引物中G+C的含量占45%~55%
D.引物的3′端可以帶有生物素、熒光素或酶切位點
E.兩條引物的Tm值應該盡量相近
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