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問(wèn)答題影響 DNA連接酶催化連接反應(yīng)的因素有哪些？

1.問(wèn)答題簡(jiǎn)述 DNA和 RNA連接酶的催化反應(yīng)機(jī)制。

2.問(wèn)答題1967 年，有5個(gè)實(shí)驗(yàn)室?guī)缀跬瑫r(shí)獨(dú)立發(fā)現(xiàn)了 DNA 連接酶，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)有什么特點(diǎn)？

3.問(wèn)答題核酸酶與外切核酸酶Ⅲ用于系列缺失突變有什么不同？

4.問(wèn)答題切口移位（nick translation）標(biāo)記DNA前，用 DNaseI處理 DNA時(shí)，應(yīng)注意什么？

應(yīng)注意Mg²⁺離子濃度和處理時(shí)間及溫度。

5.問(wèn)答題RNaseA和 RNaseH在催化活性和應(yīng)用上有何不同？

6.問(wèn)答題基因工程中，為什么不喜歡用 BAP來(lái)脫去 DNA的 5’端的磷酸基團(tuán)？

因?yàn)?nbsp;BAP耐熱和耐酚抽提。

7.問(wèn)答題什么是 S1 核酸酶作圖（S1nucleasemapping）？

S1 核酸酶作圖是一種對(duì) RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的末端和剪接位點(diǎn)進(jìn)行作圖的方法。

8.問(wèn)答題什么是測(cè)序酶（sequenaseTM）？

9.問(wèn)答題按適當(dāng)?shù)捻樞?，列出將一種 mRNA的 cDNA 克隆到表達(dá)載體所用到的酶。

10.單項(xiàng)選擇題可以在切口部位起作用的酶是（）。

A. S1核酸酶
B.外切酶Ⅲ
C. λ外切核酸酶
D.Bal31核酸酶